了解關(guān)于熒光光度計(jì)的兩三事

一、它的核心原理：“吸光再發(fā)光" 的簡(jiǎn)單邏輯

1. 第一步是 “激發(fā)"，儀器會(huì)發(fā)出特定波長(zhǎng)的光（激發(fā)光），照射到待檢測(cè)的樣品上。

2. 第二步是 “發(fā)光與檢測(cè)"，樣品中的目標(biāo)物質(zhì)吸收激發(fā)光能量后，會(huì)釋放出波長(zhǎng)更長(zhǎng)的光（熒光），儀器的檢測(cè)器會(huì)捕捉這種熒光的強(qiáng)度。

3. 最后通過(guò)熒光強(qiáng)度和已知濃度的標(biāo)準(zhǔn)樣品對(duì)比，就能算出未知樣品中目標(biāo)物質(zhì)的含量，就像用 “標(biāo)準(zhǔn)尺" 量出未知的 “長(zhǎng)度" 一樣。

二、它能做什么：常見的 3 類實(shí)用場(chǎng)景

• 檢測(cè)物質(zhì)含量：比如檢測(cè)飲用水里的重金屬（如汞、鎘）、食品中的維生素（如維生素 B2），或者生物樣本里的蛋白質(zhì)、核酸，通過(guò)熒光強(qiáng)度直接算出具體含量。

• 分析物質(zhì)特性：判斷物質(zhì)的純度，比如某些藥品里的雜質(zhì)會(huì)發(fā)出特定熒光，通過(guò)檢測(cè)是否有多余熒光，就能知道藥品純不純；還能研究物質(zhì)的分子結(jié)構(gòu)，比如判斷有機(jī)化合物的官能團(tuán)。

• 環(huán)保與科研：在環(huán)保領(lǐng)域，檢測(cè)廢水里的污染物（如農(nóng)藥殘留、多環(huán)芳烴）；在生物科研中，觀察細(xì)胞內(nèi)的熒光標(biāo)記物質(zhì)，研究細(xì)胞活動(dòng)。

三、用的時(shí)候要注意什么：3 個(gè)關(guān)鍵細(xì)節(jié)

1. 樣品要處理好：樣品不能有渾濁、沉淀，否則會(huì)擋住光線，導(dǎo)致熒光強(qiáng)度不準(zhǔn)；如果樣品濃度太高，會(huì)出現(xiàn) “熒光猝滅"（濃度越高，熒光反而變?nèi)酰?，需要提前稀釋到合適濃度。

2. 控制實(shí)驗(yàn)環(huán)境：溫度會(huì)影響熒光強(qiáng)度，比如溫度升高，很多物質(zhì)的熒光會(huì)變?nèi)?，所以盡量在恒溫環(huán)境下檢測(cè)；另外，避免強(qiáng)光直射儀器，防止外界光線干擾檢測(cè)結(jié)果。

3. 定期校準(zhǔn)儀器：就像秤要定期調(diào)準(zhǔn)一樣，熒光光度計(jì)也需要用標(biāo)準(zhǔn)樣品校準(zhǔn)，比如每次檢測(cè)前用已知濃度的熒光標(biāo)準(zhǔn)液測(cè)試，確保儀器讀數(shù)準(zhǔn)確，不然測(cè)出來(lái)的結(jié)果可能 “差之千里"。

熒光光度計(jì)的操作要點(diǎn)?